篇一:试题库
1. 根据下列资料推出某肽的氨基酸排列顺序。
1)完全酸水解得到Phe、Pro、Glu、(Lys)2、Met和NH3
2)用FDNB试剂处理得到 DNP-Phe
3)用溴化氰水解此肽得到一个以高丝氨酸内酯结尾的二肽和一个四肽
4)用胰蛋白酶水解可产生两个三肽
5)用羧肽酶A或羧肽酶B处理都不能得到阳性结果
答:Phe-Met-Lys-Gln-Lys-Pro
2. 从下列资料推出一肽的氨基酸排列顺序。
l)含有 Phe,Pro,Glu,(Lys)2;
2)Edman试剂处理生成PTH-Glu
3)用胰蛋白酶、羧肽酶A处理都不能得到任何较小的肽和氨基酸
答:Glu-Phe-Lys-Pro-Lys,Glu -Lys-Pro-Phe –Lys
3. 简述氨基酸顺序测定的方法, Edman降解法的三个具体步骤。
答:氨基酸顺序测定的方法:
在分析氨基酸后下一步就是要测定肽链或蛋白质中氨基酸的结合顺序,通常可由下列几种方法配合使用分析推测出来:
(1)N-端氨基酸单元的分析:最常用的有下列两种方法:
(a)桑格尔方法:
这项方法首先是桑格尔(Sauger,F.)提出的,他利用氨基很容易和2,4-二硝基氟氯苯(DNP)发生芳香亲核取代反应,如用一个肽和2,4-二硝基氟苯反应,显然键的N-端游离氨基和它反应,然后把这个N-端带有2,4-二硝基苯基的肽链彻底水解,在水解物中,只有一个氨基酸的α-氨基的氢被DNP取代,各种氨基酸的DNP标记化合物都是黄色的,并且都各有一个Rf值,因此很容易鉴别;所以通过这个方法,很容
易辨认出肽中的N-端是哪一个氨基酸。
(b)艾德满方法:
另一种标记N-端的氨基方法叫作文德满(Edman.P.)方法,用异硫氰酸苯酯和N-端的氨基反应,生成苯胺基硫代甲酸衍生物。该化合物在无水氯化氢作用下,发生一种关环作用,形成一个苯基乙内酰硫脲的衍生物,从肽链上断裂下来,而肽链中的酰氨键不受影响。
一个肽链经上列的反应后,其结果是失去一个N-端的氨基酸,这个氨基酸可以作为取代苯基乙内酸硫脲进行鉴定。失去一个氨基酸的肽键还可以收回,再重复上面的反应,进行第二个N-端的标记。这种方法已经可以自动化。假若肽键不是太长的话,一般讲这个方法是可靠的。
(2)c-端氨基酸单元的分析:
c-端的氨基酸单元可以通过羧肽酶催化水解,羧肽酶可以选择性切断游离羧基相邻的肽键,在溶液中切断下来的氨基酸是C-端位置的,已切断了c-端氨基酸的肽键。再与羧肽酶作用,如此不断进行,可以使整个多肽或蛋白质水解为氨基酸。根据氨基酸出现的时间,可以推断C-端氨基酸的排列顺序。实际上此法最多只能鉴定3~4个氨基酸,因此对于长链用处不大,可用于小肽(二肽、三肽等)C-端氨基酸顺序鉴定。
(3)用酶催化使肽键部分水解:
测定肽键氨基顺序的一个关键是部分分解,将一个长的肽键分解为许多小肽,然后将这些小肽分离,再进行氨基酸分析,N-端基标记,这样多次地重复下去,最终得到整个肽链氨基酸的顺序。许多消化道内分泌出来的酶可以使肽键水解。有些酶的专一性并不很强,但是有些酶的水解是具有高度专一性的,不同的酶只能分解不同氨基酸的肽键。
Edman降解法的三个具体步骤:
偶联:蛋白质和多肽的自由α-氨基经与异硫氰酸苯酯(PITC)试剂偶联,与其紧挨的第二个残基的键合力大大减弱,很容易断裂。
裂解:在无水条件下酸裂解,仅仅切下反应的那个残基,得到ATZ-氨基酸。紧挨的第二个氨基酸残基暴露
出自由的α-氨基,又可与PITC进行偶联反应。
转化:ATZ-氨基酸不稳定,三氟乙酸水溶液(25%)条件下可转化成稳定
4. 简述两种N-端测定的方法,N-端测定在什么情况下出现阴性结果?
答:两种N-端测定的方法:
1. 二硝基氟苯在弱碱性条件下,与肽链的N端氨基作用,形成二硝基苯基肽链(DNP-肽),经酸水解后,
N端残基成为二硝基苯基(DNP)-氨基酸,可用有机溶剂(如乙醚)抽提,再进行纸层析或薄层层析后,根据层析斑点的位置作定性鉴定。
2. 荧光剂DNS-Cl可与肽链N端氨基反应生成DNS-肽,经酸水解,N-末端残基形成DNS-氨基酸,用乙
酸乙酯抽提,然后用层析法鉴定。DNS-氨基酸于360nm或280nm处产生强烈荧光,根据荧光点位置确定N端氨基酸。
N-端测定在什么情况下出现阴性结果:Trp破环,环肽,N-端修饰
5. 已知丙氨酸是某酶的底物结合部位上的一个氨基酸;一次突变丙氨酸转变为甘氨酸,但酶活性没有受到影响。在另一次突变时,丙氨酸变成了谷氨酸,使该酶的活性明显丧失,请分析原因。
答:因为丙氨酸、甘氨酸都是中性氨基酸,且侧链较小,而谷氨酸是酸性氨基酸,侧链较大;谷氨酸的酸性侧链可能使酶蛋白构象发生改变,而导致酶活性丧失;或者是谷氨酸的酸性侧链干扰了酶与底物的结合,从而使得酶活性明显改变。
6.一大肠杆菌细胞中含15个蛋白质分子,每个蛋白质分子的平均分子量为40 000,假定所有的分子都处于α螺旋构象。计算其所含的多肽链长度?
答:每一个氨基酸残基绕螺旋轴上升0.15nm,
15*40000*0.15/110
已知氨基酸的平均分子质量为110d,因此总得氨基酸数目为15*40000/110。由于α螺旋每个氨基酸长度为0.15nm ,因此肽链总长度为(15*40000/110)*0.15=818.18nm
7.?-折叠的特点,简述丝心蛋白的结构特征。
?-折叠的特点:
β-折叠是另外一种常见的二级结构,处于β-折叠的多肽链相对于α-螺旋来说是肽链的一种伸展状态。分为平行(即两条链都为N→C方向)和反平行式(一条链为N→C,另一条链为C→N方向),维持β-折叠稳定性的力主要是相邻肽链(平行或反平行)之间羰基氧与酰胺氫形成的氫健。在β-折叠结构中,某个氨基酸残基沿着链长方向大约占据0.32nm~0.34nm距离。
丝心蛋白的结构特征:丝心蛋白的主要二级结构是反平行排列的?-折叠。丝心蛋白的一级结构含有长的重复序列片段,-Gly-Ser-Gly-Ala-Gly-Ala-。Gly侧链氢位于折叠平面的一侧,而Ala和Ser的甲基侧链和羟甲基侧链位于折叠平面的另一侧,堆积的折叠片靠侧链之间的van der Waals力结合在一起。
8. X-ray解析蛋白质晶体结构的步骤有哪些?其中的关键是哪一步,为什么?
X-ray解析蛋白质晶体结构的步骤:1. 得到生物大分子晶体。2. 收集和处理衍射数据。3. 确定相位,最后进行结构修订
其中最关键的步骤是第一步,制备高质量的晶体。原因:其中关键的一步是第一步,得到生物大分子结晶。因为若蛋白质是不可结晶,则铁定不能进行X 光衍射,而且结构测定的精度依赖于晶体所能达到的衍射分辨率,所以获得具有强衍射能力的晶体是蛋白质晶体结构测定分析的关键步骤,是蛋白质晶体结构分析的瓶颈。
9. X射线衍射结构分析法对于蛋白质样品有哪些要求?简述蛋白质结晶制备方法。
x射线衍射结构分析法对于蛋白质样品有二个要求:1)蛋白质制剂必须是均匀的;2)必须是较大的单品(大于0.1mm)、晶体越大,则收集到的衍射数据的质量越好。
蛋白质结晶制备方法:1、整批结晶法的原理是瞬间将沉淀剂加入蛋白质溶液中,使溶液突然达到高度饱和状态。2、悬滴法是利用气相平衡的原理,使任何挥发性的组分在小液滴和大样品池间达到平衡,使蛋白质液滴中沉淀剂及蛋白质的浓度逐渐增加,达到过饱和状态,最终析出晶体 非常适用于只有少量样品,却要
筛选大量条件的情况。3、分批静置法
10.SDS-PAGE中浓缩胶与分离胶的区别和作用,简述Western Blot的原理与方法。
区别:浓缩胶和分离胶孔径大小和缓冲液ph的不同。浓缩胶孔径大而分离胶孔径小。在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少;而Cl离子却很高,形成了较高的电压梯度。分离胶pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离。
浓缩胶的作用:不连续缓冲系统样品和浓缩胶中含tris-hcl,上下槽缓冲液含tris-甘氨酸。样品盒浓缩胶中的氯离子形成移动界面的先导边界,而甘氨酸分子则组成尾随边界,在移动界面的两边界之间是电导较低而电位梯度较陡的区域,它推动样品中的蛋白质前移并在分离胶前沿积聚。此处分离胶的ph值较高,有利于甘氨酸的解离,形成的甘氨酸离子穿过堆积的多肽并紧随氯离子之后,在分离胶中泳点动,sds多肽复合物从移动界面中解脱出来,在电位和ph值均匀的区段泳动,通过分离胶的筛分作用按照分子大小不同得到分离。
分离胶的作用:一是分子筛作用,分子量大的蛋白质泳动得速度慢分子量小的蛋白质泳动得速度快。二是电荷作用,大部分的蛋白质在ph8.3电极缓冲液的条件下带有负电荷,表面负电荷多的蛋白质迁移快,反之则慢。
简述Western Blot的原理与方法:原理:蛋白质样品经 SDS-PAGE电泳后,凝胶所含的样品蛋白质区带通过电泳方法转移、固定到载体(如尼龙膜、硝酸纤维素膜、PVDF膜)上,以膜上的蛋白或多肽为抗原,与相应的第一抗体和酶标记的第二抗体反应,用适当的溶液漂洗去未结合抗体后,置含底物的溶液中培育,显出谱带,即可检测出样品中的特异组分。
方法:。第一步是做SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳,使待测样品中的蛋白质
按分子量大小在凝胶中分成带。第二步把凝胶中已分成条带的蛋白质转移到一种固相支持物
上,用得最多的材料是硝酸纤维素膜(NC 膜)和PVDF 膜,蛋白转移的方法多用电泳转移(转
篇二:试题库建设要求
桐城师专试题库建设要求
一、 试题库建设是考试管理工作规范化、标准化、科学化的基本要求,是推进教考分离、提高教学质量的必要手段。为进一步推进我校试题库建设工作,提高试题库建设质量,特制定本办法。
二、 按期中、期末考试进度进行试题库建设,期中(中专阶段)、期末各10套试题。
三 、 试题库的建设实行项目负责人制度。项目负责人必须是该课程的主讲教师。各系根据本系课程建设规划确定的建库课目,确定项目负责人和项目组成员,报教务处备案。各系下达建库任务书,项目组负责按规定的试题质量要求要求按期完成建设任务。(试题的质量要求后附)
四 、 已经建设完成的试题库必须通过项目验收,方可正式投入使用。试题库的使用对象应有明确的规定。课程名称相同,但层次、学时、课程性质不同的,应建立相应的试题库或在同一试题库中进行类别区分。
五、 教务处负责全校试题库管理,按科目建库,要做好保密工作,任何人不得以任何形式复制试题,不得泄露试题库数据。
六、 试卷的命题环节必须严格按照学校考试管理的有关规定和试题库建设的要求执行。要依据教学大纲,重点突出,难度适中,要有一定的试题覆盖面、题型和题量,用字、格式及题干指导语要规范。
七、各系对试题库建设项目给予一定的课时补助。各系采取定额包干的方式,结合项目进度,验收合格后,补助课时。
附件 试题的质量要求
试题的质量要求
试题库应是整个教学质量的有效检验,试题库应体现教育特点“理论知识够用,强调技能,提高素质”的特色,应是各科教学大纲具体实施的总结、检验。试题库的质量,可从命题、试题评价两个方面入手。
一、命题
1、命题人员要求:必须是本学科的专业人员,熟悉本学科当前使用的教材、教学大纲,对本学科教学方法与教学理论有较高的研究水平,掌握一定的考试理论和方法;
2、考试大纲要求:命题人员根据课程的教学大纲,制定出考试大纲。
3、考试大纲的基本内容:考试的目的和性质,考试的内容和范围,考试的方法和形式(包括题型、题目数量、各部分内容所占分数比例、答卷方式等)、样题等。
考试大纲编写基本要求:知识要点要覆盖整门课程,要分章编写知识点。根据知识点设计试题。
4、试题难度要求:试题的难度分为四个等级,即易、较易、较难、难,所占比例分别为15%、30%、45%、10%。要求题型要新,题的切入点、考点应符合大纲的要求,即语意清晰、考点明确;题量包括试卷的长度和学生的计算、书写量;答案要求要点清晰、分值明确,便于流水作业。根据实际情况,每套试题按考试时间为100分钟命制,试题难度和题量应适中,避免出偏题、怪题,正常情况下能达到90%的合格率,同时能客观反映学生的学习差距。
5、每套试题的总分为100分,客观性试题如填空、单项选择、多项选择、判断等合计得分一般不超过40%,名词解释、简答等合计得分一般也不超过40%,计算、论述、应用、案例分析等得分一般应占到总分的20%以上。
6、对于同一内容的试题,不论题型是否相同,都不得在题库中简单重复出现。
7、命题原则上要求试题和试卷合一,文字排版按标准考试试卷制作,教师命题时应在题后留出足够的答题空间。
8、每套试题要制定出相应的“标准答案及评分标准”(排版要求同试卷)。
二、试题评价
组建试题库质量评价人员队伍,按学期临时组建。评价人员有专业教师和学生组成。专业的任课教师是试题库试题使用前的评价人员,学生是试题库试题使用后的评价人员。质量评价的方面包括:
1、试题应体现教学目的和教学大纲要求;
2、试题应体现全面检测的原则。试题既要检测“三基”,又要检测学生运用所学知识、理论、技能解决实际问题的能力。因此考试内容要以教学大纲规定的重点作为主体内容,着重考核学生对“三基”知识的掌握及应用.又要尽可能扩
大测试的覆盖面;
3、试题之间应彼此独立。各个试题必须彼此独立,不可相互牵连,一方面一个题目中考查的内容,其它题目不应重复考查;另一方面,题目之间不可相互暗示;
4、试题表述应简明。在不遗漏解题依据和思路的前提下,题目语意要清楚,文句简明扼要;答案明确合理;评分标准简便、准确、科学。
“三基”的具体内容是:
所谓“基本概念”就是术语和术语的解释或含义,掌握就是看到术语自己能联想或理解到含义。
所谓“基本理论”就是运用术语的阐述,分析和结论,这是学习的核心,内容往往就是一句话,要真正理解取决于对过往知识的掌握,要读懂却容易。如果过往的知识掌握不够,先读懂了再说。不过不要忘了过往的知识要补上,否则新的知识掌握不好,也记不牢。
所谓“基本方法”书本上知识段落的最后一般会总结,或者在例题(实训)中用解题(实训)步骤展示。其实这还不够,“基本方法”还需要自己通过解决实际问题加以总结出一、二、三...,这就是运用“基本概念”和“基本理论”解决实际问题的方法。
篇三:机械制图试题库及答案
机械制图试题库
一、填空题:
1、工程常用的投影法分为两类和,其
中正投影法属于平行投影法 投影法。
2、在工程技术中为了准确地表达机械、仪器、建筑物等物的形状、结构和大小,
根据投影原理标准或有关规定画出的图形,叫做 视图 。
3、在图纸上必须用画出图框,标题栏一般应位于图纸的方位。
4、图样中,机件的可见轮廓线用画出,不可见轮廓线用 画出,尺寸线和尺寸界限用 细实线画出, 对称中心线和轴线用 细点划
线画出。
5、比例是与相应要素的线性尺寸比,在画图时应尽
量采用 原值 的比例,须要时也可采用放大或缩小的比例,其中1:
2为2:1为比例。无论采用哪种比例,图
样上标注的应是机件的 实际 尺寸。
6、机件的真实大小以图样上所标注的尺寸数值为依据与及视图大小 无关。
7、标注尺寸的三要素界线 。
8、尺寸标注中的符号:R表示Φ表示
9、标注水平尺寸时,尺寸数字的字头方向应;标注垂直尺寸时,尺
寸数字的字头方向应
。角度的尺寸数字一律按位置书写。当任何图线穿过尺
寸数字时都必须 断开 。
10、平面图形中的线段有线段 三种。
11、绘图板是用来固定,丁字尺是用来画线 。
12、在机械制图中选用规定的线型,虚线是用 于中心线、对称线就用 细点划线。
13、标注圆的直径尺寸时,应在数字前加注符号,标注球的直
径符号为 SΦ 。
14、图样上的尺寸,由和尺寸起止符号组成。
15、图样上的书写的汉字采用体,其字的宽度应为高度的
16、三视图的投影规律。
17、读简单零件图的步骤起来想整体 。
18图纸的幅面分为幅面两类,基本幅面按
尺寸大小可分为 5 种,其代号分别为 A0、A1、A2、A3、A4 。
19、图纸格式分为 不留装订边和种,按标题栏的方位又
可将图纸格式分为 x型 和 Y型两种。
20标题栏应位于图纸的 右下方 标题栏中的文字方向为向 。
21.比例是指图中样上标注的尺寸应是机件的
实际尺寸,与所采用的比例 无关。
22.常用比例有和三种;比例1:2
是指 实物 是图形相应要素 的2倍,属于 缩小
比例;比例2:1是指图形是 实 物 的2倍,属于 放
大 比例。
23、图时应尽量采用 原值比例,需要时也可采用 放大 或 缩小
的比例。无论采用何种比例,图样中所注的尺寸,均为机件的实际大
小 。
24.汉字应用 仿宋 体书写,数字和字母应书写为 斜体或
25.字号指字体的,图样中常用字号有四种。
26.常用图线的种类有 实线、虚线、间隔画线、点划线、双点划线、三点画线、点线等八种。
27.图样中,机件的可见轮廓线用粗实线 ,不可见轮廓线用 虚线画
出,尺寸线和尺寸界线用 细实线 画出,对称中心线和轴线用 点
划线 画出。虚线、细实线和细点划线的图线宽度约为粗实线的
1/2 。
28.图样上的尺寸是零件的 实际 尺寸,尺寸以毫米为单位时,不
需标注代号或名称。
29、标注尺寸的三要素是尺寸数字、、尺寸线
30.尺寸标注中的符号:R表示φ表示,Sφ表
示 球,t表示厚度,
C表示 45°。
31.标注水平尺寸时,尺寸数字的字头方向应 向上;标注垂直尺寸时,
尺寸数字的字头方向应 向左
。
32.斜度是指 斜线对高度 的倾斜程度,用符号 ∠ 表
示,标注时符
号的倾斜方向应与所标斜度的倾斜方向 一致。
33.锥度是指与比,,标注时符号的锥度方 向应与所标锥度方向 一致。
34.平面图形中的线段可分为 已知 、 中间 、 连接 三
种。它们的作图顺序应是先
画出已知 ,然后画中间 ,最后画 连
接 。
35.平面图形中的尺寸,按其作用可分为和
36.已知定形尺寸和定位尺寸的线段叫已知线段;有定形尺
寸,但定位尺寸不全的线段叫 连接线段 ;只有定形尺寸没有定位
尺寸的线段叫 中间线段 。
37影法分为投影法和投影法两大类,我们绘图时使
用的是 平行投影法中的 正 投影法。
38. 当投射线互相 平行 ,并与投影面垂直 时,物体在投
影面上的投影叫 正投影 。按正投影原理画出的图形叫正投影
图。
39. 一个投影确定物体的形状,通常在工程上多采用影。
40. 当直线(或平面)平行于投影面时,其投影,
这种性质叫 积聚性;
41. 直线按其对投影面的相对位置不同,可分为线 、 投影面平行线和投影面垂直线
三种。
42. 平面按其对投影面的相对位置不同,可分为、影面平行面 和投影面垂直面
三种。
43. 与一个投影面垂直的直线,一定与其他两个投影面 平行,这样的
直线称为投影面的 垂直线
44. 与一个投影面平行,与其他两个投影面倾斜的直线,称为投影面的线,具体又可分为 水平线 、 正平线 、 侧平
线。
45.与一个投影面垂直,而与其他两个投影面不平行 的平面,称为投
影面的垂直面,具体又可
分为 铅垂面、正垂面、侧垂面 。
46.与一个投影面平行,一定与其他两个投影面,这样的平面称
为投影面的 平行 面,具
体又可分为 水平面、 正平面 、 侧平面 。
47.空间两直线的相对位置有 相交 、
48.两直线平行,其三面投影一定必然相交 ,并且交
点;既不平行,又不相交的
两直线,一定 交叉 。
49.轴测投影根据投影方向与投影面的角度不同,分为
和斜轴测 两大类。
50.最常用的轴测图为
51.正等测图的轴间角为 120度,轴向伸缩系数为 1。
52、斜二测图的轴间角为90度、135度 ,轴向伸缩系数为 p1=r1=1、
q1=0。5
53.立体分为 平面和曲面 两种,所有表面均为平面的
立体称为 平面体,包含有曲面的立体称为 曲面 。
54.常见的平面体有 棱柱、 棱锥 、 棱台 等。常见的回转
体有 圆柱 、 圆圆柱 、圆台、 等。
55.立体被平面截切所产生的表面交线称为 截交线。两立体相交所产生的
表面交线称为 相贯线。
56、立体表面交线的基本性质是 共有性 和 封闭性 。
57、角度的尺寸数字一律按都必须 断开。
58.平面体的截交线为封闭的 平面图形 ,其形状取决于截平面所截
到的棱边个数和交到平面的情况。
59、曲面体的截交线通常为 空间曲线 或平面曲线和直线 ,求
作相贯线的基本思路为 求作两相交回转体表面上一系列共有点 。
60.圆柱被平面截切后产生的截交线形状有
椭圆 三种。
61.圆锥被平面截切后产生的截交线形状有 圆 、 两相交直线 物线、 椭圆 、 双曲线 五种。
61.当平面平行于圆柱轴线截切时,截交线的形状是平面垂直于圆柱轴线截切时,截交线的形状是 圆 ;当平面倾斜于圆柱
轴线截切时,截交线的形状是 椭圆 。
62.回转体相交的相贯线形状有 圆、椭圆、空间曲线、直线 四种。
63.影响相贯线变化的因素有变化 、大小 变化
和位置变化 。
64.主视图所在的投影面称为 正立投影面,简称正面,用字
母V 表示。
65俯视图所在的投影面称为, 用字
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